Увођење производа
|
Назив производа |
Цат. бр. |
Спец. |
|
2 к Фаст Пфус ПЦР Мастер Мик |
G3305-01 |
1 мЛ |
|
G3305-05 |
5×1 мЛ |
Опис производа/Увод
Овај Фаст Пфус ПЦР Мастер Мик је ПЦР премикс спреман за употребу који садржи модификовану Пфу ДНК полимеразу, дНТП и оптимизовани ПЦР реакциони пуфер у концентрацији од 2× за рутински ПЦР, ПЦР колонија, ПЦР са сложеним шаблонима и високим ГЦ шаблонима. ПЦР амплификација се може извести додавањем само шаблона, прајмера и ддХ2О тако да концентрација Мик раствора буде 1×. Снажна способност појачања, брза брзина појачања, брзина проширења до 5-15 с/кб, висока верност, висока специфичност, производ за појачавање је раван крај. Боја за пуњење је додата производу, а појачани производ се може директно користити за детекцију електрофорезе у агарозном гелу.
Услови складиштења и испоруке
Брод са мокрим ледом; Чувати на -20 степену, важи 12 месеци. Избегавајте поновљено замрзавање-одмрзавање.
Садржај производа
|
Компонента |
G3305-01 |
G3305-05 |
|
2 к Фаст Пфус ПЦР Мастер Мик |
1 мЛ |
5×1 мЛ |
|
Мануал |
Један примерак |
|
Протокол анализе/процедуре
1. Препоручени систем ПЦР реакције
|
Компонента |
20 μЛ ркн |
50 μЛ ркн |
Коначна концентрација |
|
Темплатеа |
Променљива |
Променљива |
по потреби |
|
Форвард Пример (10 μМ) б |
0.8 μL |
2 μL |
0.4 μM |
|
Реверсе Пример (10 μМ) б |
0.8 μL |
2 μL |
0.4 μM |
|
2×Фаст Пфус ПЦР Мастер Мик |
10 μL |
25 μL |
1× |
|
(ДМСО, опционо) ц |
(0.6 μL) |
(1.5 μL) |
(3%) |
|
ддХ2О |
Додајте у 20 μЛ |
Додајте у 50 μЛ |
а: Веће количине шаблона повећавају ризик од стварања неспецифичних ПЦР производа. Мање количине шаблона смањују тачност појачања. Ако је шаблон плазмид или бактериофаг, препоручује се додавање од 50 нг-5 пг у 50 μЛ рнк. Ако је темпалтед геномска ДНК, препоручује се додавање 250нг-50нг у 50 μЛ рнк. Ако је шаблон цДНК, разблажите своју оригиналну цДНК за 2-100 пута, а запремина разблажене цДНК која је додата реакцији није већа од 10% укупне запремине реакције. Ако је темплтае бактеријска течност или узорак сировог екстракта, запремина додата реакцији није већа од 10% укупне запремине реакције. Веће количине шаблона имају тенденцију да доведу до неспецифичног појачања. Мање количине шаблона имају тенденцију да доведу до ниске ефикасности ПЦР амплификације.
б: Опсег коришћене коначне концентрације прајмера је {{0}}.2-1.0 μМ, а препоручује се 0,4 μМ. Премало прајмера може довести до ниског или никаквог приноса амплификације, а превише прајмера може довести до неспецифичне амплификације.
ц: За шаблон са високим садржајем ГЦ, ДМСО са не више од 10% укупне запремине.
2. Препоручени услови ПЦР амплификације
|
Корак |
Температура |
Време |
Број циклуса |
|
Инитиал Денатуратиона |
98 степени |
30 s-120 s |
1 |
|
Денатурација |
98 степени |
5-10 s |
25-35 |
|
Аннеалингб |
50-72 степен |
10-30 s |
|
|
Ектенсионсц |
72 степена |
5-15 с/кб |
|
|
Завршно продужење |
72 степена |
5-10 мин |
1 |
|
Чекај |
4-16 степен |
Заувек |
а: Време пре-денатурације од 30 с је погодно за већину конвенционалних шаблона; сложени шаблони могу бити денатурисани до 2 мин.
б: За амплификацију сложених шаблона, који садрже спојене прајмере, време жарења се може продужити до 30 с.
ц: Препоручени корак проширења је 5-10 с/кб на 72 степена за једноставне шаблоне као што је плазмид, 10-15 с/кб за рутинске шаблоне геномске ДНК, 15-30 с/кб за сложене шаблоне .
Напомена
1. Када користите, молимо одмрзните и добро промешајте, након потпуног одмрзавања можете ставити у стабилно складиштење на 4 степена најмање 2 недеље, избегавајте поновљено замрзавање и одмрзавање.
2. Ради ваше безбедности и здравља, носите заштитне наочаре, рукавице или заштитну одећу.
Само за истраживачку употребу!
Popularne oznake: 2 к брзи пфус пцр мастер мик, Кина 2 к брзи пфус пцр мастер мик произвођачи, добављачи, фабрика
